國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局

關(guān)于印發(fā)化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范的通知

國(guó)食藥監(jiān)許[2010]455號(hào)


各省、自治區(qū)、直轄市食品藥品監(jiān)督管理局（藥品監(jiān)督管理局）：

　　為規(guī)范化妝品檢測(cè)方法的驗(yàn)證程序，《化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范》已經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局化妝品標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)家委員會(huì)審議通過(guò)，現(xiàn)予印發(fā)。


　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 二○一○年十一月二十九日




化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法
驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范

為加強(qiáng)對(duì)化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法研究工作的技術(shù)指導(dǎo)，規(guī)范化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法研究和驗(yàn)證工作，明確檢測(cè)方法驗(yàn)證內(nèi)容和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，有效保證研究制定的檢測(cè)方法具備先進(jìn)性和可行性，特制定本規(guī)范。
1 適用范圍
本規(guī)范規(guī)定了化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法研究和建立過(guò)程中檢測(cè)方法驗(yàn)證內(nèi)容、技術(shù)要求和評(píng)價(jià)指標(biāo)。
本規(guī)范適用于化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法的驗(yàn)證與評(píng)價(jià)。
2 依據(jù)
《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》
3 釋義
3.1 本規(guī)范中所指化妝品中禁用物質(zhì)是指《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中規(guī)定的化妝品禁用組分。
3.2 本規(guī)范中所指化妝品中限用物質(zhì)是指《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中規(guī)定的化妝品組分中限用物質(zhì)、限用防曬劑、限用防腐劑、限用著色劑、暫時(shí)允許使用的染發(fā)劑等。
4 定義與術(shù)語(yǔ)
4.1 被測(cè)物質(zhì)
是指本規(guī)范第3項(xiàng)規(guī)定的禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)。
4.2特異性
在確定的分析條件下，檢測(cè)方法所具備的檢測(cè)和區(qū)分共存組分中被測(cè)物能力的特性。
4.3 線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍
4.3.1 線(xiàn)性
是指在設(shè)計(jì)范圍內(nèi)檢測(cè)響應(yīng)值與樣品中被測(cè)物質(zhì)濃度或量成比例關(guān)系的程度。
4.3.2 線(xiàn)性范圍
是指利用一種方法取得精密度、準(zhǔn)確度均符合要求的檢測(cè)結(jié)果，而且呈線(xiàn)性的被測(cè)物質(zhì)濃度或量的變化范圍。
4.4檢出限和定量下限
4.4.1 檢出限：被測(cè)物質(zhì)能被檢測(cè)出的最低量。
4.4.2 定量下限：能夠?qū)Ρ粶y(cè)物質(zhì)準(zhǔn)確定量的最低濃度或質(zhì)量。
4.5 檢出濃度和最低定量濃度
4.5.1檢出濃度：按照檢測(cè)方法操作，方法檢出限對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)濃度。
4.5.2最低定量濃度：按照檢測(cè)方法操作，定量下限對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)濃度。
4.6 精密度
在確定的分析條件下，相同濃度被測(cè)物質(zhì)的一系列獨(dú)立測(cè)量結(jié)果的一致程度，包括日內(nèi)精密度和日間精密度。
日內(nèi)精密度：同一天測(cè)定的精密度。
日間精密度：不同天測(cè)定的精密度。
4.7回收率
提取回收率：是指在確定的分析條件下，回收到物質(zhì)的實(shí)際濃度的百分比，以樣品提取和處理過(guò)程前后被測(cè)物質(zhì)含量百分比表示。
方法回收率：是指在確定的分析條件下，被測(cè)物質(zhì)測(cè)得值與真實(shí)值的接近程度，以百分比表示。
4.8 實(shí)驗(yàn)樣品
為建立和驗(yàn)證檢測(cè)方法而使用的化妝品。
4.9 空白樣品
能夠以可重復(fù)方式獲得或制備的，不含被測(cè)物質(zhì)的化妝品。
4.10 穩(wěn)定性
在確定的分析條件下，一定時(shí)間內(nèi)被測(cè)物質(zhì)在一定溶劑或空白樣品中的化學(xué)穩(wěn)定性，包括日內(nèi)穩(wěn)定性和日間穩(wěn)定性。
日內(nèi)穩(wěn)定性：在一定溶劑或空白樣品中的被測(cè)物質(zhì)在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下放置一天的穩(wěn)定性。
日間穩(wěn)定性：在一定溶劑或空白樣品中的被測(cè)物質(zhì)在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下放置多天的穩(wěn)定性。
5 檢測(cè)方法驗(yàn)證的內(nèi)容
方法驗(yàn)證包括實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證。
實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證的內(nèi)容一般包括：方法特異性、線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍、檢出限和定量下限、檢出濃度和最低定量濃度、精密度、準(zhǔn)確度、回收率和實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證的內(nèi)容一般包括：方法特異性、線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍、檢出限、最低定量濃度、日內(nèi)精密度、回收率和實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)。
6 檢測(cè)方法驗(yàn)證的技術(shù)要求
6.1 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)方法驗(yàn)證
6.1.1特異性
所采用的檢測(cè)方法需要克服任何可預(yù)見(jiàn)的干擾，特別是來(lái)自實(shí)驗(yàn)樣品中除被測(cè)物質(zhì)以外的其他組分的干擾，一般對(duì)具有代表性的空白樣品和空白樣品加被測(cè)物質(zhì)的樣品，按照確定的樣品前處理方法處理后，進(jìn)樣檢測(cè)分析，考察實(shí)驗(yàn)樣品中除被測(cè)物質(zhì)以外的其他組分對(duì)被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定有無(wú)干擾。
6.1.2 線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍
線(xiàn)性考察：制備至少5個(gè)系列濃度（不包括零點(diǎn)）的被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液，進(jìn)行檢測(cè)分析，記錄相應(yīng)的信號(hào)響應(yīng)值，以被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為橫坐標(biāo)（x）、信號(hào)響應(yīng)值為縱坐標(biāo)（y）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行相關(guān)性分析，并回歸得到線(xiàn)性方程和相關(guān)系數(shù)（r）。呈線(xiàn)性的被測(cè)物質(zhì)的濃度或量的變化范圍確定為線(xiàn)性范圍。
方法線(xiàn)性考察：在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品，制備成至少5個(gè)系列濃度（不包括零點(diǎn)）的樣品溶液，進(jìn)行檢測(cè)分析，記錄相應(yīng)的信號(hào)響應(yīng)值，以被測(cè)物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)（x）、信號(hào)響應(yīng)值為縱坐標(biāo)（y）建立方法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行相關(guān)性分析，并回歸得到線(xiàn)性方程和相關(guān)系數(shù)（r）。呈線(xiàn)性的被測(cè)物質(zhì)濃度的變化范圍確定為線(xiàn)性范圍。
必要時(shí)，信號(hào)響應(yīng)值可進(jìn)行數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行回歸計(jì)算。
6.1.3 檢出限和定量下限
檢出限和定量下限考察見(jiàn)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》。
6.1.4 檢出濃度和最低定量濃度
按照檢測(cè)方法操作，能夠從實(shí)驗(yàn)樣品背景中區(qū)分出被測(cè)物質(zhì)響應(yīng)信號(hào)的最低濃度為檢出濃度，能夠?qū)��?shí)驗(yàn)樣品背景中被測(cè)物質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確定量的最低濃度或質(zhì)量為最低定量濃度。
6.1.5 精密度
6.1.5.1日內(nèi)精密度
通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中：高濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)接近標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)或方法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的最高點(diǎn)（下同）；低濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)接近最低定量濃度（下同），于同一日內(nèi)測(cè)定至少6次，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng)值，考察該組測(cè)量值的彼此符合程度，以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。
6.1.5.2日間精密度
通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，于不同日測(cè)定，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng)值，考察該組測(cè)量值的彼此符合程度，以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。
6.1.5.3相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）的計(jì)算
， 其中：
6.1.6 回收率
6.1.6.1提取回收率
采用在空白樣品或?qū)嶒?yàn)樣品中添加高低兩種濃度被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品的方法測(cè)定，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng)值，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的濃度，計(jì)算提取回收率。
6.1.6.2方法回收率
采用在空白樣品或?qū)嶒?yàn)樣品中添加高低兩種濃度被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品的方法測(cè)定，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng)值，代入方法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的濃度，計(jì)算方法回收率。
6.1.6.3回收率的計(jì)算公式
回收率= （樣品中被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定量－樣品中被測(cè)物質(zhì)的原有量）/實(shí)際添加量×100%
6.1.7 穩(wěn)定性
6.1.7.1日內(nèi)穩(wěn)定性
通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下，在不同時(shí)間點(diǎn)分別測(cè)定，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)或方法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的濃度，并計(jì)算其準(zhǔn)確度和RSD值，考察被測(cè)物質(zhì)在溶液或空白樣品中放置一天內(nèi)的穩(wěn)定性。
6.1.7.2日間穩(wěn)定性
通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下，連續(xù)多天測(cè)定，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)或方法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的濃度，并計(jì)算其準(zhǔn)確度和RSD值，考察被測(cè)物質(zhì)在溶液或空白樣品中放置多天的穩(wěn)定性。
6.1.8 實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)分析
選擇具有代表性的實(shí)驗(yàn)樣品，按照《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》規(guī)定取樣，嚴(yán)格按照檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)分析。
6.1.9 禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果判定依據(jù)考察
化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果必須采用適宜的、可靠的方法進(jìn)行確證。采用色譜-質(zhì)譜技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，按照確定的分析條件，考察實(shí)驗(yàn)樣品與加入被測(cè)禁用物質(zhì)的空白樣品的質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間以及濃度相當(dāng)時(shí)的定性離子的相對(duì)豐度比的一致性。采用其他技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，應(yīng)建立能夠保證確證結(jié)果正確性的依據(jù)和評(píng)價(jià)指標(biāo)。
6.2 實(shí)驗(yàn)室間方法驗(yàn)證
6.2.1 參加檢測(cè)方法驗(yàn)證的機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室
參加檢測(cè)方法驗(yàn)證的機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室必須是按照國(guó)家有關(guān)認(rèn)證認(rèn)可的規(guī)定，取得資質(zhì)認(rèn)定，其檢測(cè)人員、環(huán)境條件、設(shè)施設(shè)備等應(yīng)滿(mǎn)足檢測(cè)方法驗(yàn)證的要求。每種檢測(cè)方法參加方法驗(yàn)證的檢測(cè)機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室應(yīng)不少于3家。
6.2.2 方法驗(yàn)證樣品的提供
方法建立機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室應(yīng)向參與方法驗(yàn)證的機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室提供一致的實(shí)驗(yàn)樣品、空白樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，并應(yīng)注意樣品的被測(cè)物質(zhì)的本底情況。
6.2.3 方法驗(yàn)證技術(shù)要求
實(shí)驗(yàn)室間的具體驗(yàn)證技術(shù)要求同6.1實(shí)驗(yàn)室內(nèi)方法驗(yàn)證。
6.3方法驗(yàn)證內(nèi)容的評(píng)價(jià)指標(biāo)
6.3.1特異性
實(shí)驗(yàn)樣品中共存物質(zhì)應(yīng)對(duì)被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定結(jié)果無(wú)干擾。
6.3.2 線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍
線(xiàn)性范圍適宜，能夠滿(mǎn)足化妝品中被測(cè)物質(zhì)測(cè)定要求，且線(xiàn)性良好，線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)≥0.99。
6.3.3 檢出限和定量下限
具有足夠低的檢出限和定量下限，能夠滿(mǎn)足化妝品中被測(cè)物質(zhì)測(cè)定要求。
6.3.4 檢出濃度和最低定量濃度
具有足夠低的檢出濃度和最低定量濃度，能夠滿(mǎn)足化妝品中被測(cè)物質(zhì)測(cè)定要求。通常要求方法最低定量濃度的精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不超過(guò)20%，方法回收率要求在80%-120%之間。
6.3.5 精密度
根據(jù)化妝品中被測(cè)物質(zhì)的含量及確定的分析方法，精密度應(yīng)能夠滿(mǎn)足化妝品中被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定要求，通常日內(nèi)和日間精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不超過(guò)表1所列水平。特殊情況應(yīng)予以說(shuō)明。
表1：精密度的接受范圍
被 測(cè) 物 精密度RSD
含量 ≤10 µg / kg 20%
10 µg / kg ＜ 含量 ≤ 100 µg / kg 15%
100 µg / kg ＜ 含量 ≤ 1000 µg / kg 10%
含量 ＞1000 µg / kg 5%
6.3.6 回收率
根據(jù)化妝品中被測(cè)物質(zhì)的含量及確定的分析方法，回收率應(yīng)能夠滿(mǎn)足化妝品中被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定要求。通常提取回收率要求在85%-115%之間，如果提取回收率超出85%-115%的范圍，則要求方法回收率在85%-115%之間。特殊情況應(yīng)予以說(shuō)明。
6.3.7 穩(wěn)定性
要求被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液或前處理后的樣品在穩(wěn)定時(shí)間內(nèi)使用和測(cè)定。
6.3.8 實(shí)驗(yàn)樣品分析結(jié)果
在重復(fù)條件下兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差在已確定分析方法的精密度接受范圍內(nèi)。
6.3.9 禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果判定依據(jù)
采用色譜-質(zhì)譜技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，實(shí)驗(yàn)樣品與加入被測(cè)禁用物質(zhì)的空白樣品的質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間要求一致，至少兩組濃度相當(dāng)時(shí)的定性離子的相對(duì)豐度比一致，定性離子的相對(duì)豐度比的最大偏差應(yīng)不超過(guò)表2的規(guī)定。采用其他技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，要求滿(mǎn)足陽(yáng)性結(jié)果確證依據(jù)和評(píng)價(jià)指標(biāo)。

表2：禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果判定時(shí)相對(duì)離子豐度比的最大允許偏差

相對(duì)離子豐度比（k） k ≥50% 50 %> k ≥ 20 % 20 %> k ≥ 10 % k≤ 10 %
最大允許偏差 ±20% ±25% ±30% ±50%

6.3.10 實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證結(jié)果的評(píng)價(jià)
實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)相符。